及時(shí)解決小鼠肝微粒體常見問題是保障體外代謝研究質(zhì)量的核心

2026-02-26 小鼠肝微粒體作為體外藥物代謝研究的關(guān)鍵工具，廣泛應(yīng)用于藥代動力學(xué)、毒性篩選及酶抑制評估等領(lǐng)域。其活性高度依賴制備質(zhì)量、儲存條件與實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范。若處理不當(dāng)，易出現(xiàn)代謝活性低、數(shù)據(jù)重復(fù)性差、非特異性結(jié)合高等問題，嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)論可靠性。科學(xué)識別并精準(zhǔn)應(yīng)對小鼠肝微粒體出現(xiàn)的常見問題，是保障體外代謝研究質(zhì)量的核心。一、代謝反應(yīng)速率過低或無轉(zhuǎn)化原因分析：微粒體失活、NADPH再生系統(tǒng)失效、凍融次數(shù)過多或蛋白濃度不足。解決方法：嚴(yán)格冷鏈管理：微粒體應(yīng)于–80℃保存，避免反復(fù)凍融（建議分裝...

大鼠肝微粒體實(shí)驗(yàn)中內(nèi)標(biāo)選擇與基質(zhì)效應(yīng)消除技巧

2026-02-06 在大鼠肝微粒體實(shí)驗(yàn)中，內(nèi)標(biāo)選擇與基質(zhì)效應(yīng)消除是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。內(nèi)標(biāo)選擇技巧內(nèi)標(biāo)的選擇需遵循與目標(biāo)化合物化學(xué)性質(zhì)相似、保留時(shí)間相近的原則。同位素標(biāo)記內(nèi)標(biāo)（SIL-IS）是理想選擇，因其與目標(biāo)物具有相同的化學(xué)性質(zhì)和保留時(shí)間，能抵消質(zhì)譜離子化過程中的基質(zhì)效應(yīng)及前處理差異。例如，在超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-MS/MS）測定ZG02的實(shí)驗(yàn)中，選用吲哚美辛作為內(nèi)標(biāo)，其與ZG02在色譜柱上的保留行為相似，且在電噴霧離子源中離子化效率相近，有效提高了定量準(zhǔn)確性。若...

代謝π析（三）——腫瘤細(xì)胞微粒體，容易被忽略的代謝戰(zhàn)場

2026-01-26 引言在腫瘤的微環(huán)境里，每一類細(xì)胞都攜帶著自己獨(dú)特的代謝庫。上周，一位創(chuàng)新藥企的研發(fā)總監(jiān)向我們提出了一個(gè)尖銳而典型的問題：“我們設(shè)計(jì)的前藥，在肝微粒體里活化數(shù)據(jù)很好，但一到細(xì)胞實(shí)驗(yàn)里效果就不穩(wěn)定……問題到底出在哪里？”這個(gè)疑問，像一把鑰匙，打開了臨床前藥物代謝研究中的一個(gè)關(guān)鍵盲區(qū)：我們是否過于依賴“標(biāo)準(zhǔn)答案”——肝微粒體模型，而忽視了藥物最終的“腫瘤戰(zhàn)場”本身，擁有著一套截然不同的代謝規(guī)則？今天，我們把目光從肝臟移開，聚焦于那個(gè)決定前藥最終命運(yùn)的局部環(huán)境：腫瘤細(xì)胞微粒體。01經(jīng)...

及時(shí)解決狗肝微粒體問題是保障體外代謝數(shù)據(jù)可靠性的關(guān)鍵

2026-01-23 狗肝微粒體作為藥物代謝研究的重要體外工具，廣泛應(yīng)用于代謝穩(wěn)定性評估、種屬差異分析及藥物相互作用（DDI）預(yù)測。在實(shí)際操作中，可能會因樣本質(zhì)量、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)或操作細(xì)節(jié)問題，導(dǎo)致代謝活性偏低、數(shù)據(jù)重復(fù)性差、酶失活或結(jié)果不可比等現(xiàn)象，影響研發(fā)決策。科學(xué)識別并解決狗肝微粒體的這些問題，是保障體外代謝數(shù)據(jù)可靠性的關(guān)鍵。一、代謝反應(yīng)速率異常低或無轉(zhuǎn)化原因：微粒體失活、NADPH再生系統(tǒng)失效、孵育溫度/時(shí)間不足或底物溶解度差。解決方法：確認(rèn)微粒體儲存條件（–80℃凍存，避免反復(fù)凍融），使用前冰...

代謝π析（一）——誘導(dǎo)大鼠S9代謝反而最慢？

2026-01-22 引言在體外代謝與毒理研究中，一個(gè)“反常”的數(shù)據(jù)點(diǎn)，往往是通往更深層認(rèn)知的入口，尤其近年來，隨著藥物研發(fā)新規(guī)頒發(fā)，代謝和毒理領(lǐng)域進(jìn)一步交叉融合，需要我們用“跨界”的思維分析并解決問題。#代謝π析#專欄，正是為了系統(tǒng)解讀這些關(guān)鍵案例而設(shè)立。我們將不止于呈現(xiàn)數(shù)據(jù)，更于剖析背后復(fù)雜的酶學(xué)機(jī)制、物種差異及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，揭示數(shù)據(jù)如何真正轉(zhuǎn)化為研發(fā)決策。本專欄依托#齊氏生物#在體外毒理和藥代試劑領(lǐng)域的深厚積累，旨在為毒理與藥代動力學(xué)研究人員提供一個(gè)持續(xù)交流、碰撞思想的平臺。歡迎關(guān)注，與我們...

酸化S9的應(yīng)用（下）：ADC類和小核酸類藥物研發(fā)

2026-01-13 引言在上篇中，我們揭示了#酸化S9#如何作為傳統(tǒng)小分子藥物的“代謝守門人”。然而，隨著抗體偶聯(lián)藥物（ADC）、小核酸藥物等前沿療法的崛起，藥物研發(fā)的代謝挑戰(zhàn)已發(fā)生了范式轉(zhuǎn)移。酸化S9這一經(jīng)典工具并未過時(shí)，而是通過“精準(zhǔn)應(yīng)用”，在新舞臺上繼續(xù)扮演著關(guān)鍵角色。一、酸化S9酸化S9在靶向藥物，特別是ADC（抗體偶聯(lián)藥物）和小核酸藥物（如ASO、siRNA）的研發(fā)中，其應(yīng)用邏輯與傳統(tǒng)小分子藥物既有延續(xù)性，又有顯著區(qū)別。其核心價(jià)值在于，提供更貼近肝臟生理環(huán)境的復(fù)雜酶系統(tǒng)，用于評估這些新...

細(xì)胞檢測試劑盒結(jié)果解讀的常見誤區(qū)與正確分析方法

2026-01-13 一、常見誤區(qū)忽視對照設(shè)置：未設(shè)置陰性對照（如空白樣本）或陽性對照（已知陽性樣本），導(dǎo)致無法判斷背景信號或試劑盒靈敏度，易將非特異性信號誤判為陽性。樣本處理不當(dāng)：細(xì)胞裂解不充分、固定時(shí)間過長或未洗滌，可能殘留雜質(zhì)或干擾物質(zhì)，影響檢測信號準(zhǔn)確性（如熒光背景升高）。結(jié)果判讀主觀化：依賴肉眼觀察顏色變化或熒光強(qiáng)度，未使用標(biāo)準(zhǔn)比色卡或定量分析工具（如酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀），導(dǎo)致結(jié)果重復(fù)性差。忽略臨界值范圍：將弱陽性結(jié)果直接判定為陰性或陽性，未結(jié)合試劑盒提供的臨界值（Cut-off值）或參...

酸化S9的應(yīng)用（上）：傳統(tǒng)小分子化藥研發(fā)

2025-12-31 引言在新藥研發(fā)這場漫長而昂貴的征程中，超過40%的候選藥物因不良的藥代動力學(xué)（DMPK）性質(zhì)或未預(yù)見的毒性而折戟。其中，肝臟代謝扮演著至關(guān)重要的角色——它既可能讓藥物失效，也可能將其轉(zhuǎn)化為毒物。如何在藥物進(jìn)入人體臨床試驗(yàn)前，就精準(zhǔn)預(yù)測其在肝臟中的命運(yùn)？#酸化S9#作為體外研究工具之一，正以其獨(dú)特的設(shè)計(jì)，成為小分子化藥研發(fā)中重要的“代謝守門人”。一、酸化S9酸化S9是新藥研發(fā)中一種經(jīng)過優(yōu)化的體外代謝研究工具，它通過特定的pH處理，顯著提升了其在藥物代謝和毒性篩選中的性能和可靠性...